1. Tikslas. Šios procedūros tikslas – pateikti standartizuotą aseptinių operacijų ir sterilių patalpų apsaugos procedūrą.
2. Taikymo sritis: biologinių tyrimų laboratorija
3. Atsakingas asmuo: QC Supervisor Tester
4. Apibrėžimas: nėra
5. Saugos priemonės
Griežtai atlikite aseptines operacijas, kad išvengtumėte mikrobinio užteršimo;operatoriai turi išjungti UV lempą prieš įeidami į sterilų kambarį.
6.Procedūros
6.1.Sterilioje patalpoje turi būti sterili operacinė ir buferinė patalpa.Sterilios operacinės švara turi siekti 10000 klasę. Patalpoje turi būti palaikoma 20-24°C temperatūra, o drėgmė – 45-60%.Švaraus suoliuko švara turėtų siekti 100 klasę.
6.2.Sterili patalpa turi būti švari ir griežtai draudžiama kaupti šiukšles, kad būtų išvengta užteršimo.
6.3.Griežtai venkite visos sterilizavimo įrangos ir auginimo terpės užteršimo.Tie, kurie yra užteršti, turėtų nustoti juos naudoti.
6.4.Sterilioje patalpoje turi būti darbinės koncentracijos dezinfekantų, tokių kaip 5 % krezolio tirpalas, 70 % alkoholio, 0,1 % chlormetionino tirpalas ir kt.
6.5.Sterili patalpa turi būti reguliariai sterilizuojama ir valoma atitinkama dezinfekavimo priemone, siekiant užtikrinti, kad sterilios patalpos švara atitiktų reikalavimus.
6.6.Visi instrumentai, instrumentai, indai ir kiti daiktai, kuriuos reikia įnešti į sterilią patalpą, turi būti sandariai suvynioti ir tinkamais būdais sterilizuoti.
6.7.Prieš įeidami į sterilią patalpą, darbuotojai turi nusiplauti rankas su muilu ar dezinfekavimo priemone, o tada buferinėje patalpoje persirengti specialiais darbo drabužiais, batais, skrybėlėmis, kaukėmis ir pirštinėmis (arba dar kartą nusišluostyti rankas 70% etanoliu), prieš įeidami į sterilią patalpą.Atlikite operacijas bakterijų kameroje.
6.8.Prieš naudojant sterilią patalpą, sterilioje patalpoje turi būti įjungta ultravioletinė lempa švitinti ir sterilizuoti ilgiau nei 30 minučių, o švarus stalas turi būti įjungtas, kad tuo pačiu metu pūstų orą.Baigus operaciją, sterilią patalpą reikia laiku išvalyti ir 20 minučių sterilizuoti ultravioletiniais spinduliais.
6.9.Prieš patikrinimą, išorinė bandinio pakuotė turi būti nepažeista ir negali būti atidaryta, kad būtų išvengta užteršimo.Prieš patikrinimą, išoriniam paviršiui dezinfekuoti naudokite 70% alkoholio vatos kamuoliukus.
6.10.Kiekvienos operacijos metu reikia atlikti neigiamą kontrolę, kad būtų patikrintas aseptinio veikimo patikimumas.
6.11.Sugerdami bakterinį skystį, jį sugerti turite naudoti siurbimo rutulį.Nelieskite šiaudų tiesiai burna.
6.12.Inokuliavimo adata turi būti sterilizuota liepsna prieš ir po kiekvieno naudojimo.Atvėsinus, kultūrą galima pasėti.
6.13.Šiaudeliai, mėgintuvėliai, Petri lėkštelės ir kiti indai, kuriuose yra bakterinio skysčio, turi būti pamerkti į sterilizavimo kibirą, kuriame yra 5% lizolio tirpalo dezinfekcijai, o po 24 valandų išimti ir nuplauti.
6.14.Jei ant stalo ar grindų išsiliejo bakterinis skystis, užterštoje vietoje nedelsdami užpilkite 5% karbolio rūgšties tirpalo arba 3% lizolio mažiausiai 30 minučių prieš ją apdorodami.Kai darbo drabužiai ir kepurės užterštos bakteriniu skysčiu, po sterilizacijos aukšto slėgio garais juos reikia nedelsiant nusivilkti ir išskalbti.
6.15.Visi daiktai, kuriuose yra gyvų bakterijų, turi būti dezinfekuoti prieš nuplaunant po čiaupu.Griežtai draudžiama užteršti kanalizaciją.
6.16.Kolonijų skaičius sterilioje patalpoje turi būti tikrinamas kas mėnesį.Atidarę švarų stalą, paimkite keletą sterilių Petri lėkštelių, kurių vidinis skersmuo yra 90 mm, ir aseptiškai įpurkškite apie 15 ml maistinės agaro auginimo terpės, kuri buvo ištirpinta ir atvėsinta iki maždaug 45 °C.Po sukietėjimo padėkite jį aukštyn kojomis 30–35 laipsnių temperatūroje. Inkubuokite 48 valandas ℃ inkubatoriuje.Įrodžius sterilumą, paimkite 3–5 plokšteles ir padėkite jas kairėje, vidurinėje ir dešinėje darbinės padėties pusėje.Atidarę dangtelį ir pabuvę 30 minučių, padėkite juos aukštyn kojomis į 30–35°C inkubatorių 48 valandoms ir išimkite.išnagrinėti.Vidutinis įvairių bakterijų skaičius plokštelėje 100 klasės švarioje patalpoje neturi viršyti 1 kolonijos, o 10000 klasės švarioje patalpoje – ne daugiau kaip 3 kolonijas.Viršijus ribą, sterilią patalpą reikia kruopščiai dezinfekuoti, kol pakartotiniai patikrinimai atitiks reikalavimus.
7. Žr. skyrių (Sterilumo tikrinimo metodas) skyriuose „Vaistų higienos tikrinimo metodai“ ir „Kinijos standartinė narkotikų tikrinimo darbo praktika“.
8. Platinimo skyrius: Kokybės vadybos skyrius
Švaraus kambario techninis nurodymas:
Gavę sterilią aplinką ir sterilias medžiagas, turime išlaikyti sterilią būseną, kad galėtume ištirti konkretų žinomą mikroorganizmą ar panaudoti jų funkcijas.Priešingu atveju gali lengvai susimaišyti įvairūs mikroorganizmai iš išorės. Nereikšmingų mikroorganizmų iš išorės maišymosi reiškinys mikrobiologijoje vadinamas užterštomis bakterijomis.Užteršimo prevencija yra labai svarbus mikrobiologinio darbo metodas.Viena vertus, visiškas sterilizavimas ir užteršimo prevencija, kita vertus, yra du aseptikos technikos aspektai.Be to, turime užkirsti kelią tiriamiems mikroorganizmams, ypač patogeniniams ar genetiškai modifikuotiems mikroorganizmams, kurių gamtoje nėra, iš mūsų eksperimentinių konteinerių patekti į išorinę aplinką.Šiems tikslams mikrobiologijoje yra daug priemonių.
Sterili patalpa paprastai yra nedidelė patalpa, specialiai įrengta mikrobiologijos laboratorijoje.Galima statyti iš lakštų ir stiklo.Plotas turi būti ne per didelis, apie 4-5 kvadratinius metrus, o aukštis – apie 2,5 metro.Buferinė patalpa turi būti įrengta už sterilios patalpos.Buferinės patalpos durys ir sterilios patalpos durys neturi būti nukreiptos ta pačia kryptimi, kad oro srautas nepatektų į įvairias bakterijas.Tiek sterili, tiek buferinė patalpa turi būti sandari.Patalpų vėdinimo įrenginiuose turi būti oro filtravimo įtaisai.Sterilios patalpos grindys ir sienos turi būti lygios, į jas sunkiai patenka nešvarumai ir lengvai valomos.Darbinis paviršius turi būti lygus.Tiek sterilioje, tiek buferinėje patalpoje yra ultravioletinių spindulių.Ultravioletinės šviesos sterilioje patalpoje yra 1 metro atstumu nuo darbo paviršiaus.Darbuotojai, įeinantys į sterilų kambarį, turi dėvėti sterilizuotus drabužius ir skrybėles.
Šiuo metu sterilios patalpos dažniausiai yra mikrobiologijos gamyklose, o bendrosiose laboratorijose naudojamas švarus suoliukas.Pagrindinė švaraus suoliuko funkcija yra naudoti laminarinį oro srauto įtaisą, kad būtų pašalintos įvairios smulkios dulkės, įskaitant mikroorganizmus nuo darbo paviršiaus.Elektrinis prietaisas leidžia orui praeiti pro hepa filtrą ir tada patekti į darbo paviršių, todėl darbo paviršius visada yra kontroliuojamas tekančio sterilaus oro.Be to, šone arti lauko yra greitaeigė oro uždanga, kuri neleidžia patekti į išorinį bakterinį orą.
Vietose su sudėtingomis sąlygomis vietoj švaraus suoliuko galima naudoti ir medines sterilias dėžes.Sterili dėžutė yra paprastos struktūros ir lengvai perkeliama.Dėžutės priekyje yra dvi skylės, kurios užblokuojamos stumdomomis durelėmis, kai jos neveikia.Darbo metu galite ištiesti rankas.Viršutinėje priekinės dalies dalyje yra stiklas, palengvinantis vidinį darbą.Dėžutės viduje yra ultravioletinė lempa, o indus ir bakterijas galima įdėti pro mažas dureles šone.
Aseptiniai veikimo metodai šiuo metu ne tik atlieka pagrindinį vaidmenį atliekant mikrobiologinius tyrimus ir taikymą, bet ir yra plačiai naudojami daugelyje biotechnologijų.Pavyzdžiui, transgeninė technologija, monokloninių antikūnų technologija ir kt.
Paskelbimo laikas: 2024-06-06